产品货号:
KD3368
中文名称:
X-gal储存液(20mg/ml)
英文名称:
X-gal storage solution
产品规格:
5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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产品简介:
IPTG为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。
使用方法:
蓝白色筛选:
(1)在100mL的琼脂培养基中,加入500μL的X-gal溶液(20mg/mL)、250μL的IPTG溶液(50mg/mL)和100μL的Amp溶液(氨苄青霉素100mg/mL),制作成含X-Gal、IPTG和Amp的平板培养基。高压灭菌后的培养基需冷却至55℃以下时加入X-gal、IPTG和Amp,以防失活。
(2)实际上X-gal和IPTG可以直接涂抹在平板培养基表面,90mM的平板,X-gal(20mg/mL)涂40μL,IPTG(50mg/mL)涂16μL。150mm的平板加倍,待涂布的液体干后即可使用。细菌铺板后,37℃培养过夜,可根据长出菌落的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有DNA插入片段的基因重组体)。
备注:
x-gal也可以用于酵母菌LacZ基因表达检测。参照说明书KD0559 β-半乳糖苷酶显示试剂盒。
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